agarose보다는 DNA가 잘 분리되지만 polyacrylamide를 이용하여 얻은 결과보다는 그 분리되는 정도가 낮다. 이러한 gel은 agarose의 농도를 높게 하여 사용하므로(4∼10%) DNA 조각들을 gel에서 용출한 후에 제한효소를 처리하면 효소작용이 억제되는 수가 많다.
* Agarose gel전기영동시 DNA의 이동에 영향을 주는
일반생물학및실험 Report 2020 November 01
생물학 실험 Report
의생명공학과
Ⅰ. 기본정보
실험 제목: DNAGelelectrophoresis
실험 목적: 플라스미드 DNA와 PCR 생산물을 전기영동을 통해 확인하는 실험
실험자: antler11
Ⅱ. 서론 (Introduction)
1. PCR (polymerase chain reaction)
PCR(polymerase chain reaction)은 1983년, K.B.Mullis가 고
DNAelectrophoresis(agarose gel)
(1) 기본원리
DNAgel전기영동 방법은 DNA를 크기에 따라서 분리하는 방법이다. DNA는 backbone의 phosphate group 때문에 전기영동에 사용되는 buffer에서 음전하를 띄고 있으며 두 전극 사이에 위치했을 때 양극 쪽으로 움직이게 되는 기본원리를 갖는다. 이때 DNA분자가 gel matrix사이를
Gel 물질: Agarose & Polyacrylamide.
Polyacrylamide 농도:3~20% 가능
단백질은 SDS와 polyacrylamide 전기영동(SDS-PAGE)→ 분자량에 따른 분리
PCR 산물의 확인
정제한 plasmid의 확인
DNA 단편의 정제 → gel elution
단편해석(base sequencing)
Southern & Northern blot 해석
Agarose gel로부터 DNA fragment를 자른다.
2. 1.5m
I. 서론
전하를 갖는 물질을 직류전기장에 놓으면 그 물질의 전하, 분자의 크기 및 모양 등에 따라 각각 하전 된 입자가 양극 또는 음극 쪽으로 특유의 이동을 한다. 이와 같은 현상을 전기영동(electrophoresis)이라 한다. 이동 정도의 차이에 의하여 물질의 분리 또는 순도를 검정하는 방법을 전기영동
Ⅰ. INTRO
애기장대에 대한 일반적인 내용
애기장대는 작은 쌍떡잎식물로 Brassicaceae과에 속한다. 경제적으로 중요한 작물(무, 배추, 브로콜리 등) 과 상당히 관련되어 있더라도 애기장대는 경제적으로 중요한 작물은 아니다. 그런데도 40년 동안 유전학, 생화학, 생리학 연구의 굉장한 이목을 끈다.
전기영동(agarose gelelectrophoresis)에 의한 유전자의 분리
a. Agarose gel전기영동 시 DNA의 이동에 영향을 주는 요인들로는 DNA의 분자의 크기, Agarose의 농도, DNA 형태에 따라 이동속도가 다르다. 또 전압이 높을수록 전기장의 방향, Ethidium bromide, 전기영동 buffer의 성분과 이온의 강도도 전기영동 속도에 영향을
1. Date
Day 1 – 2008년 10월 27일 월요일
2. Subject & Purpose
Digestion of DNA with Restriction Enzyme & Agarose GelElectrophoresis & Gel Purification
Plasmid pET vector와 FabG gene이 insert된 pET vector를 두 가지 제한효소, BamHⅠ과 NdeⅠ으로 자른 다음 전기영동을 통해 결과를 확인하고 Purification을 한다.
3. Principle
1) Restriction enzy
DNA > linear DNA > open circular DNA
d. 전압이 높을수록 이동속도가 빠르다.
e. 전기장의 방향도 이동속도에 영향을 미친다.
f. Ethidium bromide는 DNA 이동속도를 15%정도 감소시킨다.
g. 전기영동 buffer의 성분과 이온강도도 electrophoresis speed에 영향을 미친다.
2) DNA loading buffer
Agarose gel의 well에 DNA를 넣어 줄 때, DNA
1. DNA를 자른다는 것은 nucleotide를 연결하고 있는 phosphodiester bond를 끊어여러 DNA 단편을 만들어 내는 것을 의미한다. 이 때, 이런 역할을 하는 효소를nuclease라고 하며 그 종류로는 바깥 쪽을 절단하는 효소인 exonuclease와 안쪽을 절단하는 endonuclease가 있다.
2. 대표적 endonuclease인 제한효소(restriction enzyme)는